前言
1.问:骨组织脱水需要注意什么?
答:因骨组织基本由组织间隙,结缔组织、髓腔组织、松质骨和皮质骨等部分组成,软硬相间,结构比较复杂,同时骨组织中皮质骨硬度比较大,组织比较致密。因此对骨组织进行脱水时要注意,一方面要由低浓度酒精开始脱水,比如从40%或50%的浓度开始,且在脱水时尽量不使用无水乙醇等强脱水剂,因这些脱水剂使用后会增加骨组织的硬度,在经二甲苯等透明剂透明后,使骨组织的硬度更大,不利于制片。另一方面,建议对于以皮质骨为主的骨组织透明时,使用收缩性稍弱的脱水剂,如正丁醇、氯仿等可以兼顾脱水、透明双重作用的透明剂代替二甲苯,效果会更好。
2.问:硬组织磨片实验周期及厚度?
答:硬组织磨片的一般制作周期为2-3个月,有些小组织因脱水时间较短,一个半月可以完成制片。但对于大块组织,或含有较大植体的样本制作时间需要加长。硬组织切磨片一般采用树脂包埋,制片厚度在25微米左右。
3.问:为什么硬组织磨片制作周期较长?
答:因制作硬组织切磨片,组织不能脱钙,且多数都含有植入材料,厚度较一般脱钙骨要厚,因此其脱水及浸润时间会比脱钙骨组织要长。另外,制作硬组织切磨片,工序较多,要求较高,且有些植入材料因其硬度或韧性较大,切磨时间会延长。而普通石蜡切片,因其硬度已很小,一般包埋好的组织每块半小时就可以完成制片。所以硬组织切磨片与普通石蜡切片在处理及制片流程上有较大差别,使得硬组织切磨片的制作周期较长。但如人为的加快或缩短制作和处理周期,会极大影响最终的制片质量。
4.问:哪些标本可以制作硬组织切磨片?
答:应该说,对于含有金属、陶瓷、塑料、纤维、成骨材料、带金属支架血管,不能脱钙的骨组织、牙齿等标本都需制作硬组织切磨片。这些材料在植入组织后因其实验整体性研究的要求,不能从组织内取出植体后再脱钙,且有些材料在取出后会导致组织的碎裂,所以必须通过制作带植体的切磨片,并进行相关染色来完成组织结果的观察。
5.问:组织植入材料有哪些特殊材质,都有什么特点?
答:(1)纯钛材料因其粘性较大,在切割时会发生震动,使植体与组织发生分离,因此切片时速度不要太快;
(2)对于镁或镁合金材料,因其金属活泼性,在使用酸性染色剂染色时,植入材料会发生部分或全部溶解,出现植体变小或者植体消失,因此多采用一些不含酸的染色剂,如甲苯胺兰、亚甲基蓝酸性品红、VG等染色方法;
(3)二氧化锆、碳化硅等材料因过于坚硬,制作磨片周期较长,且费用较高。
(4)有些高分子复合材料,因其合成试剂与部分脱水、透明或浸润试剂发生反应,在脱水处理过程中发生材料的部分或全部溶解。因此,对于含有此类植入材料的组织,最好提前对材料做预试验,选择合适的脱水剂,避免造成样本损失。
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